Cas9 y ARN guía: Empareja conceptos

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BETSABE GUADALUPE JUAREZ LEON

México

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Cas9 y ARN guía: Empareja conceptosVersión en línea Asocia Cas9 y guía de ARN con conceptos clave. por BETSABE GUADALUPE JUAREZ LEON 1 Cas9: propiedades 2 ARN guía (sgRNA) 3 PAM (Protospacer Adjacent Motif) 4 Mecanismo de acción 5 Aplicaciones 6 Cuidados y consideraciones Cas9 es una endonucleasa dependiente de guía Requiere ARN guía para localizarse Corta ADN de doble hebra Reconoce la secuencia PAM adyacente al sitio diana Origen: SpCas9 (Streptococcus pyogenes) Diseñado como combinación de crRNA y tracrRNA Guía típica de ~20 nucleótidos Dirige al Cas9 para reconocer la diana Se une al Cas9 para formar un complejo Puede modificarse para reconocer diferentes secuencias PAM es necesario para el reconocimiento de Cas9 SpCas9 reconoce NGG PAM varía entre diferentes enzimas Cas9 No forma parte del sgRNA Localiza el sitio de corte en el ADN Cas9 corta ADN de doble hebra El reconocimiento es por complementariedad de bases Los cortes inducen roturas de doble hebra Reparación celular puede ser NHEJ o HDR Se pueden generar inserciones/deleciones (indeles) Edición genética en células y organismos Modelos de enfermedades y herramientas de investigación Terapias génicas potenciales Aplicaciones en agricultura y mejora de cultivos Diferenciación de funciones génicas y edición dirigida Evaluar posibles off-targets Consideraciones éticas y regulatorias Métodos de entrega (vía viral, lipofección, etc.) Seguridad en laboratorio y manejo de CRISPR Requisitos de diseño y validación experimental

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Asocia Cas9 y guía de ARN con conceptos clave.

por BETSABE GUADALUPE JUAREZ LEON

Cas9: propiedades

ARN guía (sgRNA)

PAM (Protospacer Adjacent Motif)

Mecanismo de acción

Aplicaciones

Cuidados y consideraciones

Cas9 es una endonucleasa dependiente de guía

Requiere ARN guía para localizarse

Corta ADN de doble hebra

Reconoce la secuencia PAM adyacente al sitio diana

Origen: SpCas9 (Streptococcus pyogenes)

Diseñado como combinación de crRNA y tracrRNA

Guía típica de ~20 nucleótidos

Dirige al Cas9 para reconocer la diana

Se une al Cas9 para formar un complejo

Puede modificarse para reconocer diferentes secuencias

PAM es necesario para el reconocimiento de Cas9

SpCas9 reconoce NGG

PAM varía entre diferentes enzimas Cas9

No forma parte del sgRNA

Localiza el sitio de corte en el ADN

Cas9 corta ADN de doble hebra

El reconocimiento es por complementariedad de bases

Los cortes inducen roturas de doble hebra

Reparación celular puede ser NHEJ o HDR

Se pueden generar inserciones/deleciones (indeles)

Edición genética en células y organismos

Modelos de enfermedades y herramientas de investigación

Terapias génicas potenciales

Aplicaciones en agricultura y mejora de cultivos

Diferenciación de funciones génicas y edición dirigida

Evaluar posibles off-targets

Consideraciones éticas y regulatorias

Métodos de entrega (vía viral, lipofección, etc.)

Seguridad en laboratorio y manejo de CRISPR

Requisitos de diseño y validación experimental

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Cas9: propiedades

ARN guía (sgRNA)

PAM (Protospacer Adjacent Motif)

Mecanismo de acción

Aplicaciones

Cuidados y consideraciones

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