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Practicar lab micro

por Melanie Aranza Cárdenas Macías
1

NOM 114-1994, produce h2s y gas y fermentación de la glucosa y manosa, alimentos crudos o pocos cocinados, preenrequesimiento en caldo lactosado-perptonado 35º 24 HRS, enrequesim selectivo selenitoa 37º y tetrationato (c2 gotas de yodo)44.5

2

Sembrar en medios selectivos, por dilución por estría en XDL - verde brillante, sulfito bismuto o SS 35/37º 24H. Pruebas bioq: mackonk para purificar- Agar TSI(+AMA-ROJO), UREA,MIO(+ROJO/MORAO GRIS- AMARILLO),LIA (+ROJO CAFE/MORADO.-AMARILLO) 37º 24H

3

MIO(INDOL ROVASKY + ROJO-AMARILLO/D ORNITINA +MORADO- AMARILLO), LIA (DESAMINACIÓN+ ROJO-LILA/ DESCARBOXILACIÓN LISINA+ MORADO-AMARILLO), TSI (LACTOSA SACAROSA/GLUCOSA+ AMARILLO-ROJO)

4

NOM 115, entero toxinas, prueba coagulasa y termonucleasa, baird Parker con clara de huevo crecen colonias coagulasa positiva 35/37º 48h con varilla L, ojos de pescado con zona clara(hidrolisis lectina) y negro al centro, prueba catalasa (+burbujeo)

5

Pruebas confirmatorias, de acuerdo al cuadro 1, incubar el # de colonias en ICC 35/37º 18/24 HRS, a estos realizar coagulasa(0.2 ML y plasma de conejo incubar 2 horas 37º) y termonucleasa (porta Agar azul, calentar ICC, 35º 4/24H, halo rosa +)

6

NOM 143, BACILO CORTO,GRAM +,- ESPORAS, Hemolisina B, alimentos crudos leches pescado, resisteacides,sal,congelamiento, acidez, ENREQUESIMIENTO 10 G MUESTRA EN90ML DEMI FRAZER AÑADIR PIRUVATO SI HAY LISTERIAS DAÑADAS

7

AISLAMI: después de 24/48 h de incubación, resembrar en medios LMP 30º (iluminac de Henry colonias blancas) y OXA 35º(colonias negras), luego de seleccionar colonias típicas se pasan a medio ASTEL Incubar a 35º 24h, AQUI SE HIZO CON VIP GOLD LISTERIA

8

Pruebas de identificación: movilidad en fresco(ss85%, + bacilos cortos con movilidad rotatoria), catalasa(peróxido 3% + burbujeo), tinción de gram (gram+), hemolisis (picadura en agar sangre de carnero 5% 48 h 35º, + zona clara)

9

Reducción de nitratos(caldo nitratos 35º 5 días, con reac A y B rojo +), movilidad en agar(medio SIM, 7 días tem ambiente, + forma de paraguas), carbohidratos (caldo putpura 5% carbohidratos 7 dìas 35º, + coloraciòn amarilla), resultado +en 25 gmuest

10

Crecimiento lento, aeróbico, temperatura de crecimiento inferior al mesofila, alta acidez, Agar papa DEXTROSA con cloranfenicol con una serie de diluciones utilizar la técnica de vaciado en placa e incubar a 25-27ºc por 3/5 dìas

11

Las levaduras se observan al microscopio y medio MY40 alto en azúcar, proceso: 11 gde muestra99 ML de sol de fosfatos, diluciones del -1 al -4, vaciado en placa 1ml, PDA para mohos, PDA con 1% ac láctico para levaduras incubadas 25º durante 5 dìas

12

Experimento de manera semicuantitativa, con un isopo estéril con SS se toma la muestra en una plantilla, se estrìa en caja Agar nutritivo o estándar, incubar 24 a 48 H 37º, UFC x cm2, esta prueba se hizo junto con la de listeria

13

La aflatoxinas M1 esta regulada por la NOM 241 (0.5 microg/l o 0.05 en leche pasteu), la almohadilla hay un conjugado que reacciona con el antígen, luego corren juntos o separados, luego la linea T se colorea con la muestra y la linea C es el control

14

Positiva: C y T rojas pero T igual o mas tenue que C màs intensa o si solo C tiene color, Negativa: C y T rojas pero T mas intenso, invalido si C NO TIENE COLORACIÓN

15

PARA LA EMULSION Yemas con 50% deSS, para el medio 10 ML de telurito al 1% y 50 ML de emulsión.

16

10 G de muestra en Demi FRAZER, 0.1 ML al dipositivo después de hervir y dos lineas positivo, solo la de la derecha (control) significa negativo, para identificaciòn en agar sangre, bacilos cortos gram +, paraguas, luz de henry

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