Unidad 2: MANIPULACIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLÉICOS
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Se obtienen los componentes desde un compartimiento celular esto involucra una lisis de las células que contienen los ácidos nucleicos además de una inactivación de nucleasas y separación de los ácidos nucleicos de los restos celulares
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Es la separación del ADN de proteína solubles, de otros AN no deseados, de sales lípidos, carbohidratos, y otros compuestos orgánicos
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Para muchas aplicaciones que involucran manipulación de ADN es necesario disponer de estos en .............
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Selecciona las razones por las cuales se necesita purificar el AN:
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Selecciona los contaminantes del AN:
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Selecciona los ejemplos de métodos físicos
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7
Selecciona los ejemplos de métodos químicos
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Selecciona los ejemplos de métodos enzimáticos
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Método de lisis dónde se pulveriza la muestra y se hace uso de un homogenizador
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Método de lisis dónde el contenido interior de las células o tejidos en suspensión son arrastrados al exterior
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Método de tesis de alta frecuencia de ondas que fragmenta las células
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Método de lisis de ciclos repetidos de congelación-congelación
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Quélante de iones magnesio, baja la concentración efectiva de este ión, inhibe nucleasas y minimiza la degradación de AN durante la extracción/purificación y su ph va de 7 a 8
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Selecciona los factores que afectan el rendimiento, calidad y pureza de los AN purificados
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El reto en todo procedimiento que utilice herramientas
moleculares se basa en separar los________________ deseados desde
una mezcla compleja, manteniendo la integridad de los AN
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selecciona la opción correcta de las etapas básicas de un procesamiento para la extracción y purificación de AN
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Se fundamenta en el uso de solventes orgánicos que por diferencia de densidades y por su capacidad para degradar proteínas permiten la purificación y aislamiento de AN
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Detergente que disuelve lípidos de membrana. Desnaturalizante de proteínas
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Precipita ya que moléculas grandes, son insolubles en alta concentración de sales (5M). Co-precipitación de membranas y debris celular.
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