MINIPREP-AutoevaluaciónVersión en línea BIOLOGIA MOLECULAR por Cecilia Di Capua 1 Qué puede ocurrir si olvido suplementar con el atb. adecuado el medio de cultivo del cual voy a partir? a No crecerán las bacterias inoculadas b Obtendré un rendimiento de ADN plasmídico reducido ya que podrán crecer bacterias que hayan perdido el plásmido. c Obtendré contaminación con ADN genómico. 2 Luego de bajarlas células de un cultivo O.N. y re-suspenderlas eficientemente en el lisógeno I, continuo con el protocolo de miniprep pero,tras agregar el lisógeno III, no observo ningún tipo de precipitado. ¿Qué pudo haber sucedido? a El lisógeno II era una alícuota vieja y no funcionó como debería. b Olvidé centrifugar en frío las células al bajarlas. c No estoy segurx de haber suplementado el medio con el atb adecuado 3 Qué característica permite purificar selectivamente el ADN plasmídico? a Su marcador de selección (resistencia a atb) b Su número de copias c Su tamaño y estructura. 4 Por falta de tiempo, decido no realizar el paso de extracción con solvente orgánico y cuando obtengo el índice A260/A280 me da 0,7. ¿Cuál de estas situaciones podría ocurrirme en el futuro con mi muestra? a Problemas con la digestión con enzimas de restricción b Baja concentración final de ADN plasmídico c Se observa chorreado en el chequeo por electroforesis. 5 Al sembrar una alícuota de la miniprep en el gel de agarosa no observo ninguna banda, nada! a En algún paso de precipitación/centrifugación he descartado accidentalmente el pellet plasmídico junto con el sobrenadante. b He olvidado poner en frío las muestras c He utilizado una agitación vigorosa en cada paso de mezcla del protocolo.
