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Los desoxirribonucleótidos son necesarios para que la polimerasa lleve a cabo su función, (dNTP: dATP, dCTP, dGTP, dTTP) en la mezcla de reacción para poder sintetizar la nueva hebra del ADN.
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Es una reacción para la conversión del ARN en ADNc y en general se lleva a cabo antes de una PCR, cuando se pretende analizar secuencias de ARN→ Retrotranscripción como paso previo a la PCR
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La Desnaturalizacion . Es un paso en el proceso de amplificación, el cual se realiza a 95°C y tiene como objetivo permitir el acceso de los primers a la cadena molde en sus secuencias complementarias. Esta temperatura se mantiene por 30 segundos.
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El buffer o amortiguador está compuesto por Tris-HCl y Cloruro de potasio, y es necesario para mantener el pH de 8.4 y las concentraciones de sales adecuadas para que funcione adecuadamente la ADN polimerasa.
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La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de éstas en un campo eléctrico, la cual nos permite la detección del producto de la amplificación.
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¿Técnica para detectar anomalías cromosómicas y otras alteraciones que pueden provocar enfermedades genéticas como síndrome de la X frágil o detección de patógenos infecciosos? → Hibridación
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La PCR cualitativa es una de las modalidades de la técnica de PCR, permite detectar la presencia o ausencia de un fragmento de ADN determinado. Es decir, sólo reporta si una muestra es positiva o negativa ante la presencia de un determinado ADN.
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El cofactor de la ADN polimerasa es el magnesio, un exceso produce una amplificación inespecífica de productos de PCR, mientras que una baja concentración disminuye la producción del amplificado.
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¿Cual polimerasa produce ADNs que poseen una adesina terminal no apareada colgando de su extremo 3', además que es la polimerasa que normalmente se usa para la identificación de mutaciones genéticas en el PCR?
