3.
4.
7.
2.
1.
5.
6.
Transfiere 1 mL de la dilución primaria a un tubo con 9 mL de diluyente a la temperatura apropiada, evitando el contacto entre la pipeta y el diluyente.
Si la pipeta es terminal y se transfiere un volumen de líquido equivalente a su capacidad total, escurrir aplicando la punta de la pipeta una sola vez en un área de la caja Petri sin líquido.
Mientras se afora el líquido de la pipeta, la punta de ésta debe apoyarse en el interior del cuello del frasco y mantenerla en posición vertical, para lo cual este último debe inclinarse lo necesario.
Utilizar pipetas diferentes para cada dilución inoculando simultáneamente las cajas o tubos que se hayan seleccionado según los análisis a realizar los cuales deben estar etiquetados. El volumen que se transfiera nunca debe ser menor al 10% de la capacidad total de la pipeta.
Mezcla cuidadosamente como se señaló anteriormente o mediante un Vortex.
En general, las diluciones de la muestra deben ser preparadas inmediatamente antes del análisis y éstas deben ser usadas para inocular el medio de cultivo dentro de los 20 minutos posteriores a su preparación.
La selección de las diluciones que se vayan a preparar y de aquellas que se van a inocular, dependen del número esperado de microorganismos en la muestra, con base a los resultados de análisis previos y de la información que se obtenga del personal de inspección que la haya colectado. En ausencia total de información, trabajar con las diluciones de la primera a la sexta.